[Vídeo] 14 – GROCOTT

11.90 R$

[Vídeo] 14 – GROCOTT para visualização de fungos.

Link válido por 3 meses

Categories: ,

Description

GROCOTT (para fungo)

GROCOTT (for fungi)

Código EP-12-20017

  • Quantidade de testes : mínimo de 60 testes*

  • Tempo total do procedimento : 60 minutos

  • Validade do produto : ver frasco

  • Temperatura de armazenamento : 4 a 8°C (geladeira)

  • Equipamentos complementares : Jarra de Coplin, cilindro graduado e estufa

Aplicação

Para demonstração de fungos em cortes tissulares.

Princípio

Na maior parte dos fungos, as paredes celulares são compostas de quitina, um polímero de N-acetilglucosamina juntamente com polímeros de D-glicose e D-manose, proteínas e lipídeos. O ácido crômico reage com grupos glicólicos e glicoamínicos na corrente polissacarídea oxidando-os a grupos aldeídicos e, assim, quebrando a corrente em si. Esses recém formados grupos aldeídicos reduzem o cloreto de prata, parte do complexo de prata metanamina, à prata metálica tornando-a visível.

Cuidados

Para um melhor resultado, siga as indicações abaixo:

  • Evite infectar com fungo patogênico as seções de tecido e as lâminas (manuseie somente com luva e não exponha ao ar);

  • Sempre utilize água destilada fresca;

  • Sempre utilize vidrarias limpas;

  • Evite que se depositem pó ou sujeiras nas seções de tecido;

  • Evite o contato entre as soluções e objetos metálicos.

Método

  1. Desparafinizar as lâminas em xilol por 5 minutos. Após hidratar as lâminas em álcool 99%, 95%, 70% e lavar em água corrente.

  2. Lavar por alguns segundos as lâminas em água destilada. Após, secar as lâminas.

  3. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente A (ou o suficiente apenas para cobrir o corte), deixar agir por 10 minutos.

  4. Lavar as lâminas em água corrente por 3 minutos, após secar as lâminas.

  5. Fazer a junção dos reagentes B+C+D em um becker na seguinte proporção: 40 ml reagente B + 40 gotas reagente C + 20 gotas reagente D.

  6. Colocar a solução obtida com a junção dos reagentes B+C+D junto com as lâminas dentro de uma Jarra de Coplin ou outro recipiente termo-resistente com tampa e deixar agir por 40 minutos à 1 hora em estufa (70º C). (Observar o processo dentro do tempo estimado e retirar a lâmina da estufa assim que o corte demonstrar uma cor caramelo)

  7. Lavar as lâminas em água destilada e secar.

  8. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente E (ou o suficiente apenas para cobrir o corte), deixar agir por 1 minuto.

  9. Lavar as lâminas em água corrente e secar.

  10. Colocar na seção de tecido 10 gotas do reagente F (ou o suficiente apenas para cobrir o corte), deixar agir por 1 minuto.

  11. Lavar rapidamente as lâminas em água corrente e secar.

  12. Desidratar em série de álcool ascendente até o xilol e montar as lâminas com ERV-MOUNT.

* Quantidade de teste estimada conforme o tamanho do tecido a ser corado, quanto maior o tecido maior será o volume necessário para realizar a coloração e menor será a quantidade de testes. Veja maiores detalhes no verso “INSTRUÇÕES GERAIS”.

OBS. A junção de Reagentes; B + C + D, poderá ser reutilizada no máximo 1 vez deixando em estufa por um tempo maior que o previsto na literatura, isto após ser devidamente filtrada e armazenada em geladeira por um tempo máximo de 48 horas.

Resultados (veja item coloração final no verso “INSTRUÇÕES GERAIS”)

Fungos …….…………………………………………………………………………………………………………………………………………………. negros

Mucinas……………………………………………………………………………………………………………………………………………………….verde escuro

Fundo…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..verde

Reagentes

A (tampa vermelha) Ácido crômico …………………….30 ml D (tampa vermelha) – Bórax………………………………20 ml

B (tampa branca) Água destilada………….………….2x 20ml E (tampa amarela) Cloreto de ouro…………………….30 ml

C (tampa preta) – Prata …………………………… …………..30 ml F (tampa verde) Verde Luz..……………………………..30 ml

Referências

Grocott RG. A stain for fungi in tissue sections and smears using Gomori’ s methenamine silver nitrate technic. Am J Clin Pathol 25:975-979,1955.

Churukian CJ, Schenk EA. Rapid Grocott methenamine -silver nitrate method for fungi and Pneumocystis carinii. Am J Clin Pathol 68:427-428, 1977.

INSTRUÇÕES GERAIS

Para a obtenção de um melhor resultado da metodologia e uma completa compreensão da terminologia utilizada, nós recomendamos as seguintes indicações:

Número de testes realizados

O número mínimo de testes foi calculado com 10 gotas de reagente de cada kit, que permite cobrir facilmente seções de tecidos médias ou grandes, aconselhamos seguir esta quantidade de reagentes. Em casos de seções pequenas, no entanto, pode-se utilizar menos de 10 gotas, neste caso é necessário reduzir a quantidade de todos os outros reagentes para evitar desequilíbrios.

Tempo de execução

O tempo de execução foi calculado somando-se a duração de todas as etapas do método. Ele não inclui o tempo de desparafinizar, hidratar e desidratar o corte.

Coloração final

A metodologia do kit foi padronizada a uma temperatura média de 20ºC e em condições normais de trabalho, utilizando-se os produtos indicados nesta literatura. Pode ocorrer uma pequena variação na coloração final, devido principalmente a variação da temperatura, ocorrendo esta variação deve-se alterar o tempo utilizado em cada reagente, com o objetivo de intensificar ou diminuir a coloração.

Validade

Indica o tempo em que produto permanece inalterado a partir de sua fabricação, se armazenado adequadamente. Cada Kit possui uma etiqueta com identificação do lote e data de vencimento.

Equipamento básico

Todo Kit necessita do seguinte equipamento:

  • Cuba de coloração horizontal ou uma bandeja de coloração horizontal, comercializada pelo Grupo Erviegas, código EP-51-05021.

  • Uma garrafa de lavagem (pulverizador) com água destilada para as lavagens requeridas na metodologia de cada kit, ou como alternativa, uma cuba vertical (jarra de Coplin) para as lavagens por imersão, comercializada pelo Grupo Erviegas código EP-51-30352.

Duas séries de solventes, conforme metodologia de cada kit:

  • DESCEDENTE: para desparafinizar e levar os cortes das seções para água destilada, composta de: xilol (x2), etanol absoluto (x2), etanol a 96%, etanol a 70% e água destilada.

  1. ASCENDENTE: para desidratar e limpar, composta de: etanol a 70%, etanol a 96%, etanol absoluto (x2) e xilol (x2).

Aconselhamos o uso do meio de montagem ERV-MOUNT, comercializado pela Grupo Erviegas código EP-51-05042 frasco com 500ml e EP-51-05041 frasco com 100ml.

Equipamento complementar

Nas literaturas de cada kit constam os equipamentos complementares que podem ser necessários, e que não constam no Kit, mas que estão normalmente presentes em qualquer laboratório.

Fixação e meios de inclusão

Os tempos dos métodos dos kits foram determinados a partir de cortes histológicos de fragmentos fixados em formol tamponado com pH 7 com tampão fosfato e inclusos em parafina. A utilização de outros fixados nas práticas histológicas comuns (piocromoformol de Bouin, B5) pode ser vantajosa em alguns métodos (por exemplo para os tricrômeros), mas não são aconselhadas para outros métodos.

Garantia Grupo Erviegas

O Grupo Erviegas garante o funcionamento do produto conforme especificado nesta literatura. Para maiores informações sobre o produto ou detalhes sobre outras técnicas e produtos acesse nosso site www.grupoerviegas.com.br.

RUO – ISENTO DE REGISTRO NA ANVISA

Instruções em PDF –> EP-12-20017 – Grocott – Rev 12-2018

Acesso por 3 meses

Avaliações

Não há avaliações ainda.

Seja o primeiro a avaliar “[Vídeo] 14 – GROCOTT”

O seu endereço de e-mail não será publicado. Campos obrigatórios são marcados com *